Uso
de
las
flores
de
Cantua
buxifolia
Juss
en
la
e
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b
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ó
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Resumen
.-El
objetivo
de
este
trabajo
fue
comparar
las
diferentes
concentraciones
de
colirio
de
Cantua
buxifolia
gus,
ex
Lam
con
diferentes
sustancias
permite
el
uso
oftalmológico
sin
causar
irritación
ocular
agudo.
Este
método
se
basa
en
el
método
de
la
membrana
del
huevo
asmático
coroideo.
(HET-CAM).
Los
resultados
muestran
el
peso,
volumen,
prueba
de
densidad
y
parámetros
del
huevo,
así
com
la
fertilización,
cumpliendo
con
los
criterios
especificados
en
Tecnología
HET-CAM
-
INVITTOX
(Protocolo
108).
Finalmente
se
concluye
que
el
enfoque
de
Colirio
de
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam,
con
un
índice
de
irritación
de
1
mg/ml,
2
mg/l,
3
mg/ml
es
cero
y
una
concentración
de
4
mg/ml
es
la
dosis
máxima
tolerada.
Palabras
clave
:
Dosis
toxica,irritación
ocular,
ciprofloxacino,
membrana
corioalantoidea.
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
E
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https://orcid.org/0000-0003-0067-7778
enriquemontanchez@unmsm.edu.pe
Universidad
N
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,
Lima
–
Perú.
Abstract.-
The
objective
of
this
work
was
to
compare
the
different
concentrations
of
eye
drops
of
Cantua
buxifolia
gus,
ex
Lam
with
different
substances
that
allow
ophthalmological
use
without
causing
acute
eye
irritation.
This
method
is
based
on
the
choroidal
asthmatic
egg
membrane
method.
(HET-CAM).
The
results
show
the
weight,
volume,
density
test
and
parameters
of
the
egg,
as
well
as
fertilization,
complying
with
the
criteria
specified
in
HET-CAM
Technology
-
INVITTOX
(Protocol
108).
Finally,
it
is
concluded
that
the
approach
of
Cantua
buxifolia
Juss
eye
drops,
ex
Lam,
with
an
irritation
index
of
1
mg/ml,
2
mg/l,
3
mg/ml
is
zero
and
a
concentration
of
4
mg/ml
is
the
maximum
dose.
tolerated.
Keywords:.
Toxic
dose,
ocular
irritation,
ciprofloxacin,
chorioallantoic
membrane.
Use
of
the
flowers
of
Cantua
buxifolia
Juss
in
the
preparation
of
eye
drops
for
eye
irritation
203
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Pedro
Aníbal
Solís
Céspedes
https://orcid.org/0000-0002-7339-8721
p_solis_ce@doc.uap.edu.pe
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Máximo
Ramírez
Julca
https://orcid.org/0000-0002-1385-3139
m_ramirez_ju@doc.uap.edu.pe
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https://doi.org/10.47460/uct.v26i114.605
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ojo.
Presentan
unas
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comunes
(enrojecimiento,
fotofobia
y
lagrimeo)
y
otras
dependientes
de
su
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[
1
]
.
Los
síntomas
y
signos
más
frecuentes
incluyen
enrojecimiento
del
ojo,
picor,
lagrimeo
intermitente,
fotofobia
y
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l
.
Según
la
Organización
Mundial
de
Salud,
a
nivel
mundial,
por
lo
menos
2200
millones
de
personas
tienen
deficiencia
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aún
no
ha
sido
tratada,
entre
ellas
la
conjuntivitis
[2].
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ellas
la
conjuntivitis,
cuyas
causas,
en
el
80%
de
los
casos
son
prevenibles
[3].
La
principal
finalidad
de
este
trabajo
fue
determinar
la
concentración
de
colirios
elaborados
a
base
de
flores
de
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam,
que
pueden
presentar
irritación
ocular
aguda,
analizados
por
el
método
HET-CAM.
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o
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e
s
mediante
el
método
HET-CAM.
No
se
ha
pasado
por
alto
la
evaluación
de
la
irritación
ocular
aguda
del
colirio
de
C
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[
4
]
.
II.
Desarrollo
A.
Uso
Del
Metodo:
Het-Cam
El
objetivo
de
este
método
es
evaluar
el
efecto
irritante
de
los
químicos
que
utilizan
la
placenta,
en
esta
técnica
podemos
observar
cambios
que
ocurren
en
la
membrana
como
hemorragia,
vasoconstricción
y
coagulación.
Los
huevos
fertilizados
se
incuban
por
menos
de
10
días
porque
después
de
10
días
el
feto
ha
desarrollado
un
sistema
nervioso
que
puede
causar
dolor.
La
concentración
de
sustancias
utilizadas
en
el
método
Het-Cam
suele
ser
inferior
al
5%.
Esta
técnica
implica
el
uso
del
modelo
CAM,
un
modelo
que
simula
el
ojo
humano,
para
permitir
la
posibilidad
de
utilizar
y
medir
la
toxicidad
de
los
productos
químicos
utilizados
en
la
industria
para
este
fin.
Los
huevos
son
fertilizados
por
un
máximo
de
10
días.
huevos
y
exponer
el
corion
del
huevo
al
medio
ambiente,
porque
aquí
es
donde
el
huevo
es
grande,
contiene
aire,
la
habilidad
del
analizador
es
muy
importante
al
abrir
los
huevos,
antes
de
la
CAM,
encontraremos
ver.
Esta
película
blanca
debe
retirarse
humedeciéndola
con
suero
fisiológico
durante
5
minutos,
y
después
de
retirarla,
se
observará
que
la
CAM
es
una
membrana
muy
perfundida
y
vascularizada.
B.Preparación
De
La
Membrana
Corioalantoidea.
La
figura
anterior
muestra
la
preparación
de
la
membrana,
primero
se
corta
la
cáscara
del
huevo
(a)
y
se
retira
la
primera
membrana
blanca
(b)
para
revelar
la
CAM.
Luego
se
aplican
los
productos
(c)
y
los
fenómenos
se
evalúan
visualmente
(d).
204
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
Exponer
la
coroides
a
solución
salina
y
lauril
sulfato
de
sodio
y
preparar
gotas
oftálmicas
de
Cantua
Poxyfolia
Gus
a
1
mg/ml,
2
mg/ml,
3
mg/ml
y
4
mg/ml,
se
preparará
una
solución
y
0,3
mL
de
solución
aplicada
al
corion
durante
20
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(
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los
ojos).
Los
cambios
en
la
tarjeta
se
registrarán
en
5
minutos.
Para
calcular
el
índice
de
irritación
ocular
es
necesario
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Tabla
1.
Índice
de
irritación
ocular
por
el
método
HET-CAM
C
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D
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D
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C
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Es
una
solución
estéril,
agua
o
aceite,
o
suspensión
de
uno
o
más
de
los
principios
activos,
destinada
a
la
instilación
en
el
ojo.
Por
ejemplo,
las
gotas
para
los
ojos
pueden
contener
excipientes,
Para
ajustar
el
tono
o
la
viscosidad
de
la
preparación,
para
ajustar
o
estabilizar
el
pH,
para
aumentar
la
solubilidad
del
principio
activo
o
para
estabilizar
la
preparación.
Estas
sustancias
no
afectan
el
efecto
medicinal
esperado
y
no
causan
una
irritación
local
excesiva
en
las
concentraciones
utilizadas.
Se
entiende
que
los
requisitos
galénicos
para
los
colirios
son
el
cumplimiento
de
las
siguientes
condiciones:
esterilidad,
pH,
osmolaridad
y
transparencia.
Las
lágrimas
regulares
tienen
un
pH
de
alrededor
de
7,4
y
tienen
cierta
capacidad
reguladora.
El
ojo
tolera
fácilmente
una
solución
de
cloruro
de
sodio
al
0,6
-
2%
(205-
684
mOsm
/
L),
ya
que
estas
soluciones
se
diluyen
rápidamente
con
las
lágrimas.
La
versión
actual
de
la
USP
43
se
publicó
oficialmente
el
1
de
noviembre
de
2019.
Se
realizarán
las
pruebas
establecidas
en
la
USP
para
determinar
el
pH,
la
osmolalidad
y
la
esterilidad.
205
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
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Material
y
equipos:
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de
nivel
Estándar
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multipruebas
Vasos
de
precipitados
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Autoclave
Tipo
N
Campana
de
flujo
laminarvertical
Modelo
CFV
Marca
Tecnolab
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formulación
requieran
otras
condiciones.
III.
Metodología
La
muestra
estuvo
constituida
por
huevos
fértiles
fecundados
(Gallus
gallus
domesticus)
y
hojas
y
Flores
de
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam.
Unidad
de
análisis
-
Huevos
fértiles
fecundados
(Gallus
gallus
domesticus).
-
Hojas
y
Flores
de
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam.
Población
de
estudio
Población
Animal:
SESENTA
(60)
Huevos
fértiles
fecundados
(Gallus
gallus
domesticus).
Población
Vegetal:
1
Kg.
de
Hojas
y
Flores
de
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam.
206
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
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Criterios
de
Selección
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-Huevos
con
peso
promedio
de
50
-
65
g.
-Huevos
en
perfecto
estado.
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Huevos
fértiles
con
una
incubación
máxima
de
10
días
Criterios
de
Exclusión
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Se
realizaron
nueve
grupos
para
la
recolección
de
datos,
cada
uno
con
sus
especificaciones
particulares.
Grupo
I:
Consta
de
3
ensayos
HET-CAM
de
Colirio
de
Ciprofloxacino
a
1
mg/mL
(Standar).
Se
procederá
a
añadir
la
sustancia
sobre
la
membrana
de
los
huevos,
y
se
observará
reacciones
de
hemorragia,
lisis
(desintegración
de
los
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sustancia
sobre
la
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de
los
huevos,
y
se
observará
reacciones
de
hemorragia,
lisis
(desintegración
de
los
vasos)
y
coagulación
(desnaturalización
de
las
proteínas
intra
y
extravasculares)
Grupo
III:
Consta
de
3
ensayos
HET-CAM
de
Colirio
de
Ciprofloxacino
a
3
mg/mL
(Standar).
Se
procederá
a
añadir
la
sustancia
sobre
la
membrana
de
los
huevos,
y
se
observará
reacciones
de
hemorragia,
lisis
(desintegración
de
los
vasos)
y
coagulación
(desnaturalización
de
las
proteínas
intra
y
extravasculares).
Grupo
IV:
Consta
de
3
ensayos
HET-CAM
de
Colirios
de
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam
a
1
mg/mL
(Muestra
a
estudiar).
Se
procederá
a
añadir
la
sustancia
en
estudio
sobre
la
membrana
de
los
huevos,
y
se
observará
reacciones
de
hemorragia,
lisis
(desintegración
de
los
vasos)
y
coagulación
(desnaturalización
de
las
proteínas
intra
y
extravasculares)
Grupo
V:
Consta
de
3
ensayos
HET-CAM
de
Colirios
de
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam
a
2
mg/mL
(Muestra
a
estudiar).
Se
procederá
a
añadir
la
sustancia
en
estudio
sobre
la
membrana
de
los
huevos,
y
se
observará
reacciones
de
hemorragia,
lisis
(desintegración
de
los
vasos)
y
coagulación
(desnaturalización
de
las
proteínas
intra
y
extravasculares)
Grupo
VI:
Consta
de
3
ensayos
HET-CAM
de
Colirios
de
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam
a
3
mg/mL
(Muestra
a
estudiar).
Se
procederá
a
añadir
la
sustancia
en
estudio
sobre
la
membrana
de
los
huevos,
y
se
observará
reacciones
de
hemorragia,
lisis
(desintegración
de
los
vasos)
y
coagulación
(desnaturalización
de
las
proteínas
intra
y
extravasculares)
207
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
Grupo
VII:
Consta
de
3
ensayos
HET-CAM
del
control
negativo:
Suero
fisiológico
NaCl
0.9%.
El
Suero
fisiológico:
siendo
una
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pasta
de
dientes,
champú
y
jabones
de
baño,
entre
los
efectos
dañinos
están
remover
aceites
y
grasas
de
la
piel,
así
como
causar
irritación
en
piel
y
ojos.
Por
sus
propiedades
irritantes
es
usada
en
el
método
het-cam
como
un
control
positivo.
Grupo
IX:
Consta
de
3
ensayos
HET-CAM
de
Colirios
de
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam
a
4
mg/mL,
(Muestra
a
estudiar),
para
observar
signos
de
irritación
aguda
y
considerar
sino
lo
hubiera
como
dosis
máxima
tolerada
y
si
lo
hubiera
como
irritación
toxica
severa
para
no
recomendar
su
uso
a
esta
concentración.
A.
Recolección
Y
Selección
De
Los
HuevosFértiles
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huevos
óptimos
para
la
incubación.
Fig.
1.
Prueba
de
densidad
positiva,
se
observa
en
la
imagenel
huevo
fértilcon
densidad
óptima(cámara
de
aire
óptima)
Fig.
2.
Pruebade
densidad
contaminada.
Se
observa
en
la
imagen
huevos
que
no
pasaron
la
prueba
de
densidad.
Cámarade
aire
contaminada
208
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
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indicadores
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(temperatura
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humedad
relativa
constante
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A
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del
tercer
día
se
realiza
una
inversión
de
la
cohesión
fetal,
luego
se
programa
para
rotar
automáticamente
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D.
Elaboración
de
colirios
Prueba
de
solubilidad
del
ciprofloxacino
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Los
solutos
junto
con
otras
entradas
se
dirigen
a
una
campana
de
humos
de
flujo
laminar
y
encendemos
la
lámpara
U
V
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continúo
activando
la
entrada
de
aire
de
la
campana
de
humos
de
flujo
laminar.
(Filtro
HEPA)
Delinear
la
cámara
de
aire
Procedemos
a
pelar
cuidadosamente
la
cáscara.
Encontraremos
la
membrana
que
recubre
el
corion.
Se
procedió
a
retirarla
membrana
de
la
cámara
de
aire.
Fig.
1.
Concentración
del
colirio.
209
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
E
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6000
veces
superior
a
la
de
los
residuos.
Como
el
valor
crítico
de
F
(p-valor)
es
menor
a
0.05,se
concluye
que
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IV.
Resultados
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Tabla
2
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Análisis
de
la
irritación
ocular
aguda
del
colirio
elaborado
de
las
flores
de
la
Cantua
buxifolia
Juss,
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Student
para
dos
muestras
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encontrar
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(p=0.000),
se
rechaza
la
hipótesis
de
que
el
colirio
elaborado
de
las
floresde
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aguda.
Al
encontrar
un
p
menor
a
0.05
(p=0.000),
se
rechaza
la
hipótesis
de
que
el
colirio
de
la
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam,
elaborada
a
diferentes
concentraciones
analizada
por
el
método
HET-CAM,
es
una
solución
apta
ya
que
no
generaIrritación
ocular
aguda
(Tabla
4).
Tabla
3.
La
irritación
ocular
aguda
en
el
colirio
de
la
Cantua
buxifolia
Juss,
ex
Lam,
elaborada
a
las
concentraciones
1mg/mL
2
mg/mL
3
mg/mLy
4
mg/mL
por
el
método
HET-CAM.
*Chi
cuadrado
para
dos
muestrasrelacionadas.
210
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
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Los
valores
de
temperatura,
humedad
relativa,
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de
incubación,
peso,
volumen
y
parámetros
de
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de
toxicidad
oftálmica
del
colirio
de
voriconazol
y
fluconazol
con
HET-CAM,
donde
se
realizaron
los
mismos
controles
d
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l
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a
d
.
Se
encontró
que
concentraciones
de
Cantua
buxifolia
Juss
colirio,
ex
Lam,
a
1
mg/ml,
2
mg/ml,
3
mg/ml
tienen
un
índice
de
irritación
de
0,
determina
el
no
tóxico
y
la
concentración
4mg/ml
es
la
máxima
tolerada
dosis.
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Juss,
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Lam
colirio
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mg/ml
también
produce
resultados
discretos.
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Los
valores
de
temperatura,
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relativa,
días
de
incubado
y
los
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de
peso,
tamaño,
pruebasde
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técnicaHET-
CAM
–
INVITTOX
(protocolo
108).
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irritación
eran
nulos,
determinando
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concentración
4mg/mLcomo
dosis
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Las
concentraciones
del
colirio
de
la
Cantuabuxifolia
Juss,
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Lam,
a
1
mg/ml,2
mg/ml,
3
mg/ml
y
4
mg/ml
dieron
como
resultado
de
No
irritante.
Y
el
coliriode
Ciprofloxacino
a
las
concentraciones
de
1
mg/ml,
2
mg/ml
y
3
mg/ml,
dieron
como
resultado:
No
irritante
y
ligeramente
irritante.
211
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
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Batista,
G.
Murillo,
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Pérez,
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Tur,
D.
Portuondo
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Pérez,
«medigraphic,»
2011.
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212
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.
Los
autores:
213
Enrique
Christian
Montánchez
Mercado
,
Químico
Farmacéutico
y
Bioquímico,
Maestro
en
administración
de
Servicios
de
Salud,
Especialización
en
Alta
Dirección
en
Salud
Pública
y
Hospitales
por
la
Universidad
Nacional
Mayor
de
San
Marcos.
Diplomado
en
Gestión
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Salud
Pública
y
Medio
Ambiente,
Miembro
del
Consejo
Consultivo
de
la
Carrera
Profesional
de
Ingeniería
en
Industrias
Alimentarias
en
la
Universidad
San
Ignacio
de
Loyola.
Pedro
Anibal
Solis
Cespedes.
Doctor
en
salud
pública.
Maestro
en
salud
pública
con
mención
en
epidemiologia.
Inspector
en
saneamiento
ambiental.
Médico
Veterinario.
Coronel
en
retiro
PNP.
Docente
con
experiencia
en
el
campo
de
la
investigación.
Expositor
y
conferencista
en
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Máximo
Ramírez
Julca.
Doctor
en
Educación
y
Doctor
en
Administración,
Maestro
en
Docencia
Universitaria
y
Gestión
Educativa
por
la
UAP,
Bachiller
en
Ciencias
de
la
Educación
y
Licenciado
en
Educación
USMP,
es
un
profesional
de
la
educación
y
especialista
en
el
campo
de
la
investigación.
Consultor
y
asesor
en
proyectos
educativos
para
gobiernos
regionales
y
entidades
del
Estado,
docente
universitario
con
categoría
de
asociado,
actualmente
se
desempeña
como
docente
a
tiempo
completo
en
la
Escuela
de
Posgrado
de
la
Universidad
Alas
Peruanas
Montánchez et al.
Uso de las flores de Cantua buxifolia Juss en la elaboración de colirio para la irritación ocular.